Resumen: Inmunología y técnicas serológicas

📋 Esquema del Curso

1. Anticuerpos anti-Ig y detección serológica
2. Citotoxicidad y presentación antigénica
3. Neutralización e inmunoglobulinas
4. Afinidad y estudios serológicos
5. Antígenos recombinantes
6. Anticuerpos policlonales y monoclonales
7. Inmunocomplejos y reacciones visibles
8. Efecto zona y falsos negativos
9. Controles de calidad diagnóstica

📖 1. Anticuerpos anti-Ig y detección serológica

🔑 Conceptos clave y definiciones

• Anticuerpo anti-Ig: Reconoce determinadas regiones de otra inmunoglobulina, que pueden ser constantes o variables.

📝 Puntos esenciales

📌 En una prueba serológica, la unión del anticuerpo del paciente al antígeno viral indica reconocimiento específico, mientras que un anticuerpo anti-Ig humana detecta inmunoglobulinas humanas unidas al sistema.

• Un resultado positivo de anticuerpos puede indicar infección pasada, infección actual o respuesta a la vacunación, y no demuestra por sí solo que el virus esté activo.

💡 Truco mnemotécnico

El anticuerpo del paciente reconoce el antígeno; el anti-Ig detecta la inmunoglobulina humana.

📖 2. Citotoxicidad y presentación antigénica

🔑 Conceptos clave y definiciones

• CMH: Un conjunto de moléculas que presenta fragmentos de antígenos a los linfocitos T.

★ Imprescindible

• En la citotoxicidad, la célula diana es reconocida, la perforina facilita la entrada de granzimas, estas activan caspasas y las caspasas desencadenan la apoptosis.

📌 Los linfocitos T citotóxicos CD8+ reconocen antígenos presentados por CMH de clase I, mientras que las células NK pueden destruir células alteradas sin reconocer un antígeno específico mediante un receptor T.

📌 El CMH I se encuentra en casi todas las células nucleadas y presenta principalmente antígenos intracelulares a linfocitos T CD8+; el CMH II aparece principalmente en células presentadoras de antígeno y presenta antígenos extracelulares captados a linfocitos T CD4+.

Complementos

• Las células NK integran señales activadoras e inhibidoras y pueden reconocer IgG unida a una célula diana para destruirla mediante citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC).

💡 Truco mnemotécnico

Perforina → granzimas → caspasas → apoptosis.

📖 3. Neutralización e inmunoglobulinas

🔑 Conceptos clave y definiciones

• Neutralización: La unión de un anticuerpo a un antígeno, una toxina o un virus que bloquea su actividad perjudicial sin implicar necesariamente su desaparición inmediata.

★ Imprescindible

📌 La IgG es abundante en sangre y líquidos extracelulares y participa en neutralización, opsonización y ADCC, mientras que la IgA protege principalmente las mucosas.

Complementos

• En la neutralización viral, el anticuerpo se une a la proteína que permite al virus reconocer un receptor celular y dificulta o impide la unión del virus a la célula y la infección.

• La IgA se encuentra en saliva, lágrimas y secreciones respiratorias e intestinales, y contribuye a impedir la adhesión de microorganismos a las mucosas y su penetración en los tejidos.

• En una segunda exposición a un antígeno de la gripe, las células de memoria pueden producir una respuesta más rápida e intensa, a menudo con producción importante de IgG específica, aunque depende de la cepa, las exposiciones previas y la vacunación.

💡 Truco mnemotécnico

Neutralizar bloquea una función; la citotoxicidad elimina la célula diana.

📖 4. Afinidad y estudios serológicos

🔑 Conceptos clave y definiciones

• Afinidad: La fuerza de unión entre un único sitio de un anticuerpo y un epítopo del antígeno.
• Sensibilidad diagnóstica: La capacidad de una prueba para detectar correctamente a las personas que tienen la condición estudiada; una prueba muy sensible produce pocos falsos negativos.
• Estudio seroepidemiológico: Detecta anticuerpos en muestras de suero para investigar la exposición de una población a agentes infecciosos.
• Avid ez: La avidez es la fuerza global de todas las uniones entre un anticuerpo y un antígeno multivalente.

📝 Puntos esenciales

• Cuanto más bajo es el límite de detección de una prueba, menor cantidad de sustancia hace falta para detectarla.

• Los estudios epidemiológicos analizan la distribución de las enfermedades, sus causas o factores de riesgo y las formas de prevenirlas.

• Los estudios seroepidemiológicos permiten:

  • Estudiar la evolución y distribución de una enfermedad.
  • Identificar grupos de población más expuestos.
  • Valorar el efecto de las vacunas.
  • Conocer la proporción de personas con anticuerpos específicos.

💡 Truco mnemotécnico

La afinidad describe la unión molecular; la sensibilidad describe el rendimiento diagnóstico.

📖 5. Antígenos recombinantes

🔑 Conceptos clave y definiciones

• Antígeno recombinante: Una proteína producida mediante ingeniería genética al introducir el gen que la codifica en un sistema de producción, como bacterias, levaduras o células cultivadas.

📝 Puntos esenciales

• 🔄 La producción sigue estos pasos:

  1. Introducir el gen de la proteína de interés en un sistema productor.
  2. Fabricar la proteína.
  3. Purificar la proteína para utilizarla como reactivo.

• Los antígenos recombinantes se utilizan para preparar reactivos de pruebas diagnósticas, producir antígenos para vacunas y estudiar la respuesta inmunitaria.

💡 Truco mnemotécnico

Gen de interés → sistema productor → proteína purificada.

📖 6. Anticuerpos policlonales y monoclonales

🔑 Conceptos clave y definiciones

• Anticuerpos policlonales: Una mezcla producida por distintos clones de linfocitos B que reconoce diferentes epítopos de un mismo antígeno.
• Anticuerpos monoclonales: Producidos por un único clon de células productoras de anticuerpos y reconocen el mismo epítopo.
• Dilución límite: Distribuye células en pocillos a una concentración baja para obtener cultivos derivados de una única célula y asegurar que los anticuerpos procedan de un mismo clon.

★ Imprescindible

• La técnica clásica de hibridomas inmuniza un animal, aísla linfocitos B productores de anticuerpos, los fusiona con células de mieloma, selecciona hibridomas, criba los que producen el anticuerpo específico y clona y expande un clon productor.

Complementos

• Los anticuerpos policlonales pueden dar una señal intensa y seguir reconociendo el antígeno si un epítopo está modificado, pero pueden presentar más reacciones cruzadas y variar entre preparaciones.

• Los anticuerpos monoclonales ofrecen alta especificidad, homogeneidad y buena reproducibilidad, pero pueden dejar de reconocer un antígeno si su epítopo está alterado o no es accesible, y en algunas técnicas dar una señal más débil que una mezcla policlonal.

• El hibridoma combina la producción de un anticuerpo específico con la capacidad de proliferación sostenida de las células de mieloma.

💡 Truco mnemotécnico

Muchos clones reconocen varios epítopos; un clon reconoce un epítopo.

📖 7. Inmunocomplejos y reacciones visibles

🔑 Conceptos clave y definiciones

• Inmunocomplejo: El conjunto formado por un antígeno unido a un anticuerpo.
• Aglutinación: La formación de agregados visibles cuando anticuerpos unen partículas o células que presentan antígenos en su superficie.

• Precipitación: La formación de un precipitado insoluble cuando antígenos solubles y anticuerpos forman redes suficientemente grandes.

📝 Puntos esenciales

📐 Fórmula - La formación de un inmunocomplejo se expresa como $\text{Antígeno} + \text{Anticuerpo} \rightarrow \text{Inmunocomplejo}$.

• En una prueba con partículas de látex recubiertas de antígeno, los anticuerpos de la muestra pueden unir las partículas y provocar aglutinación.

• La IgM secretada suele ser un pentámero de cinco unidades, cada una con dos sitios de unión al antígeno, por lo que puede presentar hasta diez sitios de unión, aunque los que se unen efectivamente dependen de las condiciones y de la estructura antigénica.

💡 Truco mnemotécnico

Partículas o células aglutinan; antígenos solubles precipitan.

📖 8. Efecto zona y falsos negativos

🔑 Conceptos clave y definiciones

• Zona de equivalencia: La proporción adecuada entre antígenos y anticuerpos que permite formar redes extensas y alcanzar la reacción máxima.

★ Imprescindible

📌 La prozona resulta de un exceso de anticuerpos y puede causar aglutinación débil o ausente, mientras que la postzona resulta de un exceso de antígenos y también puede causar aglutinación débil o ausente.

• La prozona y la postzona pueden producir falsos negativos porque, aunque el marcador está presente, las redes formadas no son suficientemente visibles.

Complementos

• La dilución de una muestra permite observar si la reacción esperada aparece al cambiar la concentración de antígeno o anticuerpo y puede ayudar a detectar un efecto zona y determinar el título de anticuerpos cuando la técnica lo permite.

💡 Truco mnemotécnico

El exceso de anticuerpos es prozona; el exceso de antígenos es postzona.

📖 9. Controles de calidad diagnóstica

★ Imprescindible

📌 El control positivo (C+) contiene el marcador conocido y debe dar una reacción positiva, mientras que el control negativo (C−) carece del marcador que se quiere detectar y debe dar una reacción negativa.

• Si C+ y C− son positivos y negativos, respectivamente, los controles son correctos; si ambos son negativos puede haber un fallo técnico, si ambos son positivos puede haber reacción inespecífica o contaminación, y si C+ es negativo y C− positivo los controles son incorrectos.

Complementos

📌 Si los controles no presentan los resultados esperados, no se deben validar los resultados de las muestras hasta resolver el problema.

💡 Truco mnemotécnico

El control positivo debe reaccionar; el negativo no.

📊 Tablas de síntesis

Presentación antigénica por CMH

Anticuerpos policlonales y monoclonales